新手艺可高效标志细胞卵白质
科技日报北京1月27日电 (记者张梦然)美国麻省理工学院开辟的一项名为“CuRVE”的新技巧,能在史无前例的速率、平均性跟多功效性下,高效标志完全3D构造里数百万个细胞中每个细胞的卵白质,展现了其一天内对全部啮齿植物年夜脑及其余年夜型构造样本停止丰盛标志的才能。这项结果宣布在最新《天然·生物技巧》杂志上。 剖析细胞发生的卵白质是生物学跟神经迷信研讨的主要内容,由于它们反应了细胞的功效状况或对情况(如疾病或医治)的反映。只管显微镜跟标志技巧已有明显提高,但仍缺少一种牢靠且适用的方式来追踪全部3D构造(如小鼠年夜脑某人脑的年夜地区)中麋集陈列的单个细胞的卵白质表白。传统方式平日只能察看载玻片上的薄构造切片,无奈片面懂得全部体系中的卵白质表白情形。 新方式“CuRVE”用一种称为“eFLASH”的技巧实现了对年夜而致密构造的平均处置,处理了抗体渗透构造速率慢的成绩。团队经由过程庞杂的盘算模仿优化了差别的设置跟参数,不只可能经由过程转变脱氧胆酸浓度跟标志液的pH值来调理抗体联合,还应用随机电转运技巧减速抗体在构造中的分散。 “eFLASH”这一存在持续可调联合速率的减速疏散体系,可利用于标志多种差别范例的构造,包含60多种差别的抗体用于标志小鼠跟年夜鼠的全部年夜脑细胞、全部小鼠胚胎、其余小鼠器官(如肺跟心脏),以及包含人类在内的年夜型植物的脑构造块。 这些标本均在一天内实现标志,表现出极高的效力。别的,差别的制备进程不须要新的优化步调,进一步简化了试验流程。“CuRVE”技巧不只进步了标志速率跟平均性,还提醒了其余普遍应用的标志方式所未能发明的新看法,为生物学跟神经迷信的研讨开拓了新的远景。【总编纂圈点】 卵白质表白是一个精细而庞杂的生物进程。以后追踪3D构造中单个细胞卵白质表白的方式存在范围,传统方式只能察看构造薄片,无奈统揽全局。美国麻省理工学院开辟的新技巧,能处理抗体渗透慢的成绩。经盘算模仿优化,其可调理抗体联合、减速抗体分散。该技巧能标志多种差别范例的构造,进步标志效力,可在一天内实现对啮齿类植物年夜脑的标志,为咱们带来新的“视线”。它可助力人们对更多庞杂生物学跟神经迷信成绩开展进一步摸索。
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